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色谱柱如何冲洗？用于反相层析柱的冲洗：在下列溶剂中，每个色谱柱至少25 mL，清洗色谱柱无缓冲盐的流动相100%100%腈+25%异100%正己烷*如果使用己烷-冲洗色谱柱，则必须先用异冲洗色谱柱，然后再使用反相流相!!!用于正相色谱柱的冲洗：以50 mL以上的溶剂冲洗色谱柱(分析柱)。50%+50%100%醋酸。

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气相色谱柱如何老化？装上色谱柱后，先将色谱柱加热至少3倍，再将载气流速调至正常流速，并从100度升温至老化温度快速升至老化温度。陈化温度——在样品分析终温20度以上，但未超过色谱柱恒温温度上限的状态下，通过恒温2小时的方法快速老化，新的毛细管色谱柱迅速老化，当色谱柱老化时，升温速度没有限制，可以用升温速率老化色谱柱。18.液相色谱仪的重要组成部分是什么？液体有什么检测器？脱气装置，泵，温度计，自动进样器，检测器。探测器有：VWD可变波长检测器、 DAD二极管阵列检测器、 MWD多波长检测器、 RID检测器、示差检测器、 FLD荧光检测器。溶剂进口过滤器如何选择？传统和毛细液相使用的溶剂过滤头有：20μ m玻璃过滤头(5041-2168)、 PTFE连接头(5062-8517)、不锈钢过滤头(5062-8517)、不锈钢过滤头(01018-60025)配制液相用的溶剂过滤头有：40μ m玻璃过滤头(3150-0944)和 PTFE接头头7 mm/4 mm (G1361-23204)如果流动相涉及下列溶剂，应避免使用不锈钢过滤头：碘化锂、、高浓度的及***，有机酸溶液中的1%会腐蚀不锈钢、和异或 THF混合液等。每天用35%的浸泡玻璃滤芯一小时(不用超声波清洗，造成玻璃)。

色谱柱的使用与维护色谱柱的正确使用与维护非常重要，一不小心就会降低柱效，缩短使用寿命，甚至损坏。为了维护色谱柱，在进行色谱分析时，必须注意以下问题。调整流量过快…防止压力、温度急剧变化和机械振动。气温骤降或使色谱柱从高处落下，都会影响柱内填充状态；柱压突然升高或降低，也会对柱内填充物产生冲力，所以在调节流速时要缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓(如前面所述)。反向色谱柱…一般情况下，色谱柱不能反冲，只有生产者指示柱可以反冲时，才能反冲去除留在柱头的杂质。反之，反向将迅速降低柱效。前柱与保护柱…为了避免***固定相，应选择适当的流动相(特别是 pH)。有时候，一预柱可以在进样器前连接，分析柱是硅胶粘合时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱前先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质溶解。不要把复杂的样品，特别是生物样品直接注入到柱中，需要对样品进行预处理，或者在进样器与色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般为填充具有相似固定相的短柱。可以也应该经常更换保护柱。

如何排除小概率故障？【1】泵压跳动，跳动范围约10 bar。对策：原来的小白头有点脏，换了之后还没有解决；2、将主动阀上的阀芯取出后，发现类似气泡存在，在超声5分钟内浸入-水溶液中试着除去气泡，重新安装后观察，仍未解决；更换新阀芯，安装完毕后，再也没有跳动，观察一段时间后比较平稳，顺利解决。

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层析柱的常见问题分为三个方面，即色谱柱污染、堵塞、固定相流失。造成色谱柱污染的原因通常是对高沸点杂质的吸附，会影响分析组分与固定相的正常吸附，导致基线噪声变大，产生前沿峰、拖尾峰、杂乱峰和未知峰等，解决色谱柱污染的常用方法是老化色谱柱，一般设置柱温低于温度极限30℃，老化10 h以上。细杂物质颗粒进入色谱柱导致柱子堵塞，导致基线电流增加、前沿峰、分叉峰、肩峰等异常峰形，甚至不出峰，一般情况下，要剪去柱子上几厘米的切割器(如毛细管切割器或金刚石玻璃刀)，切口要与柱子内壁成90°，而且要保证柱子切口干净，否则柱切口处产生的湍流涡旋将对峰的形状造成不利影响，对进样器和检测器的长度也有要求，通常插入进样器和检测器的深度分别为2.5 cm和8.5 cm [4]。由于固定相位丢失，柱效下降，基线漂移，基线电流增加，峰形不规则，柱效下降的严重程度可以通过降低柱温至室温，观察基线是否可调零来判断，可尝试剪掉色谱柱的一定距离，如果不可调零则表示固定相流失严重，则应更换新的色谱柱。

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