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张燕华 女士
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发布时间:2021-11-12 00:58:53
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进样器的维护给样机可分为手动和自动两种,尽管它们的工作方式不同,但其使用要点基本相同。自动进样器常见的问题是交叉污染,造成交叉污染的原因非常直接,样品在进样针的内外表面都残留着样品,然后再进入色谱系统。要解决交叉污染,主要靠清洁。2、操作精细,手动进样器的操作要领大致相同,应使用液相色谱 LC进样针,进样时要插到针头,不使用时要将针头留在进样器内,在使用前后要及时清洗。
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色谱柱维护化合物分离的关键是色谱柱。维护好的色谱柱具有很高的塔板数量,仪器基线稳定。1、避免压力、温度急剧变化和机械振动。气温骤降或使色谱柱从高处落下,都会影响柱内填充状态;柱压突然升高或降低,也会对柱内填充物产生冲力,所以在调节流速时要缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前面所述)。2、溶剂的组成应逐渐改变,尤其是反相色谱,不能直接由改为全水,反之亦然。3、色谱柱反冲,纳谱分析小分子分离液相色谱柱 ChromCore系列和 EcoPak系列色谱柱进行反冲;纳谱分析的手***谱柱 UniChiral系列色谱柱可以反冲、反冲去除留在柱头的杂质。而纳谱分析生物大分子液相色谱柱 BioCore系列色谱柱不能反冲,否则反冲会迅速降低柱效。4、为避免***固定相,选择合适的流动相(特别是 pH)。有时候,一预柱可以在进样器前连接,分析柱是硅胶粘合时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱前先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质溶解。
随着流动相的脚印,泵到了高压泵,是液相色谱中核心的部分,也是昂贵的一个组成部分,要小心使用:3.1许多情况下,泵的问题都反映在压力上,压力波动也是常见的一类问题,泵的正常压力波动一般在2%以内,切变平稳,异常波动通常是由于气泡和盐引起的:如果流动相中的气泡没有被脱气机除掉,那么就会产生压力波动,通常我们可以通过重新 purge流和再脱气流来解决这类问题;盐造成的波动主要是因为在流动相中加入了浓度较高的缓冲盐,在含盐流动相与有机相混合时,盐会有微小的析出,从而导致压力异常波动,解决这类问题可以考虑适当的降低盐浓度,或者使用代替有机相,如果由于各种原因要用到这种流动相,那么就会产生压力波动,因此,解决这类问题可以考虑适当降低盐浓度,或者用代替有机相,如果由于各种原因要用到这种流动相,那么就会产生压力波动,因此,解决这类问题可以考虑适当的降低盐浓度,或者用代替有机相,如果由于各种原因要用到这种流动,那么就会造成压力波动,所以在含盐流动相与有机相混合时,盐会有微小的析出,从而导致压力异常波动,解决这类问题可以考虑适当降低盐浓度,
在水泵维修中还有一项经常要做的工作是更换 purge阀上的滤白头,其实难点不是更换这个白头本身,而是要判断什么时候换水,通常判断标准是是否要更换这个白头,而要考虑更换的标准。替换下来的白头,还可以断定仪表的使用情况:如果白头是白的,看起来不脏,但就是堵,有可能是流动相中的盐分有析出,这台仪器长期忍受高盐流动相。
联用的定量经验:1、要用目标离子的碎片定量,特征性强,排除干扰;2、在定量分析方法设置上,尽可能提高扫描速度,提高准确率和重复性(通过 a减少扫描质量数的范围,可增加目标峰的扫描次数,或将一个样品全部分析时间断分为 n个 segments,对目标离子单独设置扫描模式);3、经色谱柱分离后,一定要进行定量分析,避免竞争性离子的存在影响目标离子的离子化效率;如果目标分子没有从竞争分子中完全分离,则使目标分子的离子化效率降低,造成样品分子的定量结果偏低,当然标准浓度样品也应采用同样的方法进行分析。4、如果样品全部是纯品,无需通过色谱柱直接进样分析,包括做标准曲线的样品(尽管不推荐直接进样分析)。5、如果所用的离子源的喷针位置是可移动的,一定要记得在做标准曲线时做其位置,否则其位置移动后在相同条件下进入质谱的离子流量会发生变化,标准曲线就不能使用了!不改变 shealthgas和 auxgas的流速,否则对进入质谱的样品数量都会产生影响,这将影响到质谱的样品数量。
建立的标准曲线一个月后,如要重复使用,就用 QC样品来检验标准曲线!7、对扫描范围、流动相组成、梯度、流速等方面不做任何改动,否则应重做标准曲线。目标峰扫描次数、流动相组成改变了离子化效率,流速改变了色谱峰的保留时间和峰宽。离子阱的优点在于多层-定性层,而四级柱的强项在于量化;对热稳定性差的样品,增加气速,降低毛细管温度,保证定量的重现性,一旦该方法固定后,不要轻易改变。
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