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张燕华 女士
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发布时间:2021-11-09 00:59:02
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以下列出了一些色谱柱的清洗溶剂和顺序,作为参考:以正已烷(或庚烷)、和的硅胶柱依次冲洗,然后按相反的顺序冲洗,所有的溶剂必须严格脱水。可以清洗掉残留的强极性杂质,并对硅胶表面进行活化。反相柱用水、、、(或)依次冲洗,然后按反序冲洗。若下一步分析所用的流动相不含缓冲液,就可以忽略一步用水冲洗。可洗去残留的非极性杂质,多次在()冲洗时多次***100-200μ l四氢,有助于去除强疏水性的杂质。四氢与或混合溶液可去除类脂。有时候还要***几次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脱可去除蛋白质污染。用稀酸缓冲洗阳离子交换柱,用稀碱缓冲液冲洗,把交换性能很强的盐去掉,再用水、、(除去固定相表面吸附的有机物)、、水,依次冲洗。
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保存色谱柱时,柱中应充满或,柱连接处应紧固,防止溶剂挥发干燥。请勿将缓冲液留在柱内待一夜或更久。8、在使用色谱柱时,如果压力升高,有一种可能是烧结过的滤片被堵塞,此时应更换滤片或取出清洗;还有一种可能是大分子进入柱内,使柱头受到污染;如果柱效降低或色谱峰变形,可能会出现柱头塌陷,体积增大。当出现后两种情况时,小心将柱头接头拧开,用洁净的小钢将柱头填料取出1~2 mm的高度(注意将污染的填料取净)再将柱内填料整平。接着将其填充到色谱柱中,用合适的溶剂润湿固定相(与柱相同),压平,然后拧紧柱接头。这种处理后柱的效能有所提高,但难以***到新柱水平。柱失效一般为柱端,在分析柱前安装与分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米),可起到保护、延长柱寿命的作用。使用保护柱会失去一些柱效,这是值得的。
色谱柱一般用硅胶作基质,只能在pH2-9的范围使用。柱使用一段时间后,可能会有一些吸附作用强的物质留在柱顶,尤其是一些有色物质更容易在柱顶的填料上看到。在使用一段时间后,新的柱顶填料会塌陷,使柱效降低,此时还可补加填料,使柱效***。如 ODS柱,在每次工作结束后用强力洗脱剂,如 ODS柱,以冲洗到基线平衡。用盐缓冲液作流动相时,用完后用无盐流动相冲洗。含有卤族元素的化合物(氟、氯、)可能对不锈钢管道造成腐蚀,不适合长时间接触。HPLC仪柱式安装如果不经常使用,应每4-5天开一次电源,冲洗15分钟。
探测器的维护1.光源部分探测器的重要组成部分是光源,光源对发射能量有要求,一旦能量衰减到一定程度,就会出现一系列影响光源使用的问题,如基线噪声变大、灵敏度下降等。一般 UV灯的使用寿命为2000 h,当达到这一时,我们就特别注意灯的能量状况,可通过仪器维护软件中自带的“灯能测试”功能判断,测试结果将分别评估低、中、高三个波长段的能量,一旦某一波长段测试结果显示失败,就表示需要更换灯。2.检测池探测器的另一个重要组成部分就是检测池,也称为循环池。一般来说,检测池是大家比较关心的问题之一,因为检测池的耐压能力一般都不高,所以一旦被堵住,很容易造成损坏。实际上,检测池一般不太容易堵塞,因为几乎所有的颗粒杂质都会被色谱柱截获,因此堵塞检测器的东西基本不是来自样品,很可能是后来“产生”,例如,含盐流动相残留在检测池中导致盐析出。六、废液处理LC废液中大部分含有,对***有一定的危害,对环境也会造成污染,严禁随意倾倒,应及时处理。当前,国内大多数实验室都是把废液运往废液处理站进行无害化处理。
四极离子阱, QTrap从技术上讲,传统的 ***Q四极杆增加了辅助射频,可以做选择性激发;或者从功能上来说,给 ***Q提供了多级串级功能。优点:具有 MRM、 SRM、中性丢失和多级串级功能,非常适合未知样品的结构分析。劣势:或者是分辨率太低代表产品:ABI/Sciex,QTrap5500系列质谱:世界上灵敏的离子阱系统。线形离子阱, Linear Ion Trap增强版的3D离子阱好处:与传统的3D离子阱相比,灵敏度提高了10倍以上;多层系列质谱。劣势:与 ***Q相比, MRM或中性丢失等特征群筛选功能不能进行。代表产品:Thermo公司的 LTQ XL线性离子阱质谱仪:增强的二维线性离子阱质谱仪,具有的灵敏度和超快的循环时间,能保证在的时间内,以少的样本获得的质谱信息。
线性与三维离子阱的比较研究这一对比也许是见的一幕-线型离子阱的灵敏度、分辨力、速度、通量等指标都优于传统的3D离子阱。线型离子阱市场严重蚕食了3D离子阱市场,尤其是在中国质谱市场,由于用户爱追新潮、求大求好,线型离子阱在中国市场上非常受欢迎。但事实上,线型离子阱在国外并不流行,尤其是一些老用户,因为习惯了离子阱的指标,对于价格高的线型离子阱并不太流行,尤其是一些离子阱老用户,对于价格高的线型离子阱来说,价格高的线型离子阱就不太流行了。四极杆飞行时间串联质谱, QTOFQMS采用 QMS作为质量过滤器, TOFMS作为质量分析工具。
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